Instrumento de sequência de Sanger

O sequenciamento de Sanger, usado para o seqüenciamento de nucleotídeos de DNA, foi criado e recompensou o Prêmio Nobel por Frederick Sanger em 1977.
Como funciona o sequenciamento de Sanger?
Em primeiro lugar, usamos o primer para ter uma ligação curta ao iniciante ao lado da região de interesse no modelo de DNA. Em seguida, a polimerase de DNA começa a se acumular do primer, adicionando nucleotídeos complementares à fita de DNA.
Para encontrar a parada que nos permite identificar a base do final do fragmento de DNA específico. O princípio de sequenciamento de Sanger é aplicado para remover um átomo de oxigênio do ribonucleotídeo. DDNTP (Dideoxynucleotídeo) é colocar uma chave em uma engrenagem. A enzima polimerase não adicionará mais nucleotídeos normais a essa cadeia de DNA. A extensão iria parar.
Podemos identificar o nucleotídeo que termina em cadeia por um corante fluorescente específico. O analisador genético de superyears pode suportar corante fluorescente de até 6/8 cores para ser exato.
O sequenciamento de Sanger resulta na formação de produtos de extensão de vários comprimentos terminados com dideoxinucleotídeos na extremidade 3 '.
A eletroforese capilar separa os produtos de extensão.
Uma corrente elétrica injeta as moléculas em um tubo capilar longo preenchido com um polímero de gel.
Durante o CE (eletroforese capilar), fragmentos de DNA carregados negativamente avançam para o eletrodo positivo.
A velocidade na qual um fragmento de DNA migra através do meio é inversamente proporcional ao seu peso molecular.
Esse processo pode separar os produtos de extensão por tamanho em uma resolução de uma base.
Um laser excita os fragmentos de DNA marcados com corantes enquanto passam por uma pequena janela no final do capilar.
O corante excitado emite luz em um comprimento de onda característico que é detectado por um sensor de luz.
O software pode interpretar o sinal detectado e traduzi -lo em uma base de base.
Uma reação de sequenciamento é realizada na presença de todos os quatro nucleotídeos terminados, um pool de fragmentos de DNA que são medidos e separados por base por base.
Arquivo de dados mostrando a sequência do DNA em um eletroferograma colorido.

Com base no princípio de sequenciamento de Sanger, o analisador de genes produzido pelo gene de superyears pode ser usado para análise de sequência de genes e análise de fragmentos, que podem detectar rapidamente genes multi-alvo (10-70 loci) por vez. O gen O analisador ETIC tem as vantagens de baixo custo de detecção única, operação simples e interpretação de resultados intuitivos e diretos. É uma ferramenta poderosa para inspeção da articulação de médio porte e de vários genes.

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