Analisador genético Eletroforese capilar para MLPA

Descrição do analisador de DNA

O método MLPA (Amplificação da sonda dependente da ligação multiplex) detecta múltiplas alterações no número de cópias de genes ou locais de loci. Atualmente, a MLPA é usada para verificar um grande número de distúrbios hereditários e perfil de tumores. Como o cientista holandês Jan Schouten o inventou pela primeira vez, o método MLPA foi publicado pela primeira vez em 2002 ' Pesquisa de ácido nucleico' . O princípio do MLPA é aplicar o projeto de sonda específico direcionado a uma região de interesse em cada DNA da amostra. O método MLPA consiste nas seguintes etapas:

Desnaturação> Ligação de hibridação > PCR MLPA Amplicons Eletroforese capilar> Análise de dados

Utilizamos o DNA de amostra colocado no termocicro para separar os fios de DNA. Em seguida, a fita de DNA direcionada será hibridada, somando os oligonucleotídeos da sonda esquerda e direita. A enzima ligase ligará os oligos da sonda imediatamente ao alvo adjacente no DNA da amostra. Portanto, o oligo hibridizado da sonda esquerda e direita começa a catalisar a criação de uma ligação covalente no meio. Depois que os oligos da sonda forem selados, as sondas MLPA serão amplificadas exponencialmente usando o par de iniciadores de PCR único.

A reação de PCR consiste nas três etapas: desnaturação, recozimento do primer e alongamento do primer. Essas etapas da amplificação por PCR são repetidas muitas vezes. Os iniciadores marcados com fluorescência, que passarão pela eletroforese capilar para passar por um detector, são incorporados ao tamanho dos produtos de amplificação. A fluorescência medida foi visualizada como um padrão de pico, o chamado eletroferograma. Os dados brutos do analisador de eletroforese capilar formam a entrada da análise MLPA.

Os analisadores genéticos do gene superyears podem ser usados ​​não apenas para sequenciamento de Sanger, mas também para análise de fragmentos. Análise de fragmentos Primeiro, obtém os fragmentos de DNA marcados com fluorescência, realiza a eletroforese capilar usando um analisador genético e compara o padrão de tamanho relativo da amostra com os marcadores padrão de tamanho projetado através do software de análise.

O analisador genético do gene superyears pode ser usado na eletroforese capilar durante o processo do experimento MLPA, e os dados obtidos podem ser usados ​​para o software de análise profissional (compatível).

Os eletroferogramas a seguir ilustram as amostras direcionadas em comparação com um conjunto de amostras de referência e proporções de sonda de cada amostra em um gráfico de proporção. Usando o analisador genético do gene de superyears para aplicação de MLPA para analisar a atrofia muscular espinhal e seus resultados podem ser visualizados. Além disso, a apresentação clássica da MLPA da série 116 também pode ser apresentada.

Caso 1. Atrofia muscular espinhal (SMA)

Vantagens da MLPA

A tecnologia MLPA combina muitos recursos da hibridação da sonda de DNA, tecnologia de PCR e eletroforese capilar e desenvolve seu recurso dependente da ligação.

• Curto tempo demorado, os resultados podem ser obtidos dentro de 24 horas
• Sequenciador de primeira geração, sem investimento adicional em instalações de hardware

• Alta precisão, pode detectar mutação de base única ou SNP e número de cópias

• Uma única reação pode conter 60 sondas diferentes para detectar a cópia da sequência alvo
• A operação é simples e o processo de operação é a operação de experimento de biologia molecular de rotina
• Requisitos de amostra baixos, apenas 20ng de DNA genômico humano como modelo

Vantagens do analisador de fragmentos de DNA

1. Com base no método Sanger, excelente desempenho do padrão dourado;
2. Support até a fluorescência de 8 cores, detecção única para mais de 70 locais;
3. Alta resolução, alta repetibilidade e excelente qualidade de sequenciamento;
4. Plataforma de detecção aberta e aberta, compatível com kits comerciais no mercado;
5. Interface da linguagem personalizável e gratuita da atualização de software;
6. Desempenho de alto custo, economizando 50%+ de custo em materiais e reagentes de consumo;
7. Certificado pela Administração Nacional de Produtos Médicos da China ( NMPA) e CE, garantindo diagnóstico in vitro (IVD) aplicável ;
8. Suporte técnico perceptivo e serviços pós-venda, um ano de garantia gratuita;

Aplicativo de analisador de genes automático

MLPA pode ser aplicado a:
1. Detecte pequenos rearranjos: BRCA1, BRCA2, MSH2, etc.
2. Detecte uma ampla gama de rearranjos cromossômicos: síndrome de Williams, síndrome de Prill/Angelman, etc.
3. Detecção de alterações no número de cópias nas regiões subteloméricas.
5. Diagnóstico do tumor: alterações do número de cópias em todos, CLL, oligodendrogliomas, melanomas, neuroblastomas e outras doenças.
6. Detecção quantitativa de metilação: Praderill. Síndrome de Angelman, Fragilex et al.
7. Análise de mRNA da apoptose e resposta inflamatória.

Todas as informações aprofundadas em 12/maio/2022 pela equipe de marketing da SuperYears co.